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产品名称：

cDNA文库构建
产品价格：
厂商性质： 工程商 产品时间： 2020-11-09
cDNA文库是指某生物某发育时期所转录的全部mRNA经反转录形成的cDNA片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。标准cDNA文库构建的基本原理是用 Oligo（dT）作逆转录引物，或者用随机引物，给所合成的cDNA加上适当的连接接头，连接到适当的载体中获得文库。
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 文库构建流程：

1.       样品QC

 

2.       从总RNA中分离mRNA（原始文库将采用至少2 µg mRNA进行构建）

 

3.       以带有NotI酶切位点的oligo（dT）Linker Primer为反转录引物，再在双链cDNA的5’端加SalII adaptor

 

4.       NotI酶切、过柱去除小片段

 

5.       将合成的双链cDNA与载体进行连接，连接产物转化DH10B感受态细胞

 

6.       cDNA文库的QC：检测库容量（重组子克隆数目）；随机挑取30个克隆子进行PCR鉴定和双向测序分析，检测含插入片段的克隆子比例，检测平均插入片段大小

 

客户提供

 

        注明样品的种属，收集样品后，应将样品立即置于干冰保持低温运输。

 

我们提供

 

       含有文库的甘油菌和质量分析鉴定报告

 

质量保证

 

      文库含有至少4 x 106个原始克隆

 

       样品平均插入片断保证大于1.0 kb

 

     有超过85%的载体含有插入片段

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