咨询热线
15800446246
您的位置: 网站首页 > 技术文章 > 使用核酸提取类试剂盒必须掌握一系列手段

使用核酸提取类试剂盒必须掌握一系列手段

发布日期: 2020-02-26
浏览人气: 1158
   核酸提取类试剂盒采用异硫氰酸胍及表面活性剂联合裂解细胞技术,添加独特的病毒凝集剂,不需要进行仿抽提,可从细胞培养物、血浆、血清、分泌液、腹水、拭子等的样本中快速提取痕量的病毒或细胞的核酸(DNA和RNA)。
  1、取待抽提的血清50μl置于微型离心管中,加入200μl抽提A液,颠倒数次充分混匀;(混匀后室温放置5分钟可达到效果) 
  2、加入250μl抽提B液,颠倒数次充分混匀(混匀后室温放置10min可达效果),13000rpm离心10min,倒去上清; 
      3、加入200μl抽提C液,颠倒数次混匀,13000rpm离心5min,吸弃上清(尽量去掉上清); 
  4、室温放置或50℃加热5min晾干,加入25μl样本稀释液混悬沉淀物,短暂离心使液体落于管底部,上清液即为提取得到的核酸。 
  注:对于分泌物或棉拭子,先用适量无菌生理盐水把拭子上的分泌物洗入离心管中,或者把拭子泡在无菌生理盐水中,捻动使分泌物分散于液体中,然后高速离心5min后,去除大部分上清,余下的样本即应用上述步骤抽提核酸。
  注意事项: 
  1、如果抽提的是病毒RNA,即提即用,保存请置于-80℃。 
  2、抽提A液及抽提B液可根据所用的提取物的量等倍加大用量。 
  3、抽提A液低温保存会有絮状物析出或凝结是正常现象,使用前置于50℃使融化,颠倒混匀,不影响使用。 
  4、血浆样本尽管也能直接提取,但先用红细胞裂解液处理去掉红细胞,效果将更好。 
  5、加入样本稀释液后仍有部分沉淀不溶解是正常现象,不影响后续实验。
扫一扫访问手机站扫一扫访问手机站
访问手机站