支原体PCR检测试剂盒是一种通过巢式PCR法(NestedPCR)检测培养细胞等生物材料中是否存在支原体污染的检测试剂盒。利用两对引物通过巢式PCR法特异性扩增支原体基因组片段,从而实现对支原体的高灵敏度特异性检测的。
支原体(Mycoplasma)是最小、简单的原核生物。支原体有如下特征:支原体无细胞壁结构,所以针对细胞壁的许多常见的抗生素,如青霉素或β-内酰胺类抗生素对支原体无效;支原体大小介于细菌和病毒之间,约为0.2-0.8μm,所以部分支原体可通过0.22μm滤器,常规的过滤对支原体无效;很多支原体由于自身的生物合成能力有限而依靠宿主提供营养,所以通常吸附或散落在细胞表面和细胞之间。支原体的这些特征使细胞培养过程中存在支原体污染的风险,细胞的支原体污染已经成为一个世界性的普遍问题。
支原体污染可能会严重影响细胞的状态,使细胞的基因表达、代谢特征发生变化,导致细胞生长减缓、分化和死亡异常,严重影响细胞功能。这些影响因素会严重影响实验结果的可靠性、可重复性和一致性,因此支原体污染的检测非常重要。
支原体PCR检测试剂盒特点:
1、内控对照为独立包装。
2、高特异性,一次检测即可涵盖所有常见易感染细胞的支原体物种(包括欧洲药典规定的9种支原体)。与细菌和真核DNA无交叉反应。
3、高灵敏度,Z低检测限可达到≤10CFU/ml。
4、有相应配套的支原体基因组DNA和细菌基因组DNA,便于特异性验证。
5、有相应配套的支原体绝对定量标准品,便于最后定量检测。