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蛋白共提取试剂盒厂家中了解细胞总蛋白提取的方法

发布日期： 2017-03-13
浏览人气： 3020
    蛋白共提取试剂盒适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中提取线粒体蛋白。提取过程简单方便。制备的线粒体蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。蛋白共提取试剂盒厂家介绍细胞总蛋白提取的方法。
    1. 裂解液制备：每500ul冷的Buffer I中加进2ul蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
    2. 在4℃，1000rpm条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
    3. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
    4. 每5×106个细胞中加进500ul冷的裂解液，混匀后，在4℃条件下振荡15-20分钟。
    5. 在4℃，14000rpm条件下离心15分钟。
    6. 快速将上清吸进另一预冷的干净离心管，即可得到总蛋白。