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腺病毒包装服务的简要流程

发布日期: 2015-09-15
浏览人气: 1358
    腺病毒(adenovirus)是一种无包膜的线状双链DNA病毒。它的宿主范围很广,既可感染分裂细胞,又可感染非分裂细胞。腺病毒包装服务通过Cre/loxP 获得重组病毒,这个过程发生在HEK293细胞中,从而避免在细菌中重组。在腺病毒的包装系统中,腺病毒基因组质粒负责携带腺病毒的大部分骨架元件,穿梭质粒负责携带外源基因表达盒。两者共转染包装细胞后发生同源重组,携带外源基因的病毒基因组被包装,产生重组的腺病毒颗粒。腺病毒包装服务的简要流程:
    1、构建表达 siRNA/miRNA 的腺病毒载体 
    2、采用 PacI 消化纯化的质粒。 
    3、消化好的腺病毒表达载体转染 293A 细胞,收获细胞以制备病毒粗提液。
    4、将病毒粗提液感染 293A 细胞以扩增病毒。
    5、分装,-80℃保存。