咨询热线
15800446246
您的位置: 网站首页 > 技术文章 > 如何将磷酸化蛋白检测试剂盒的提取更为方便

如何将磷酸化蛋白检测试剂盒的提取更为方便

发布日期: 2020-04-16
浏览人气: 926
   磷酸化蛋白检测试剂盒的提取过程简单方便,可在1小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。本试剂盒含有的独特配方能够溶解细胞膜包括细胞质膜和核膜。磷酸化蛋白检测试剂盒的操作要求如下:
  1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
  2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
  3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
  4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
  5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
  6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
  7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
  8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
  9.在450nm波长处测定各孔的OD值。
扫一扫访问手机站扫一扫访问手机站
访问手机站