咨询热线
15800446246
您的位置: 网站首页 > 技术文章 > 如何避免病毒DNA抽提试剂盒的错误操作

如何避免病毒DNA抽提试剂盒的错误操作

发布日期: 2018-01-17
浏览人气: 1033
    病毒DNA抽提试剂盒采用可以特异性结合核酸的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,样品裂解后,DNA在高盐条件下与硅胶膜结合,在低盐、高PH值时DNA从硅胶膜上洗脱下来。本试剂盒用于从小剂量的血液、干血点、血清、微量组织、漱口水、毛发、微切割组织等微量样品中提取基因组DNA。
    1.在1.5 mL螺旋盖塑料离心管(不要使用压盖式塑料离心管)中加入0.1-0.2 mL液体样品。如果病毒需要富集,可以将1.5 mL液体在4℃ 24,000 g冷冻离心60分钟, 移弃1.3 mL后继续操作。
    2.加入0.6 mL病毒DNAOUT溶液,振荡30秒混匀后室温放置10分钟。 
    3.振荡30秒混匀后加入0.7 mL异丙醇,振荡30秒混匀后,15,000 g室温离心15分钟。 
    4.移弃上清,注意不要触及管底的DNA沉淀,加入1.0 mL 70% 乙醇,振荡数秒后 15,000 g室温离心5分钟。 
    5.移弃上清,注意不要触及管底的DNA沉淀。再短暂离心数秒, 移弃残留上清(残留的乙醇会影响后续反应)。此时离心面的管壁上将有可见的膜状沉淀,加入200 μl 超纯水,用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁的膜状沉淀,使其溶解。溶解液混浊或有少量不溶物是正常现象,如果溶于200 uL水而样品使用量不超过PCR体系的1/2时,不溶物一般不会影响后续PCR反应。不要离心只取上清使用,因为不溶沉淀物中含有DNA,必须取混合液使用(哪怕很浑浊)。 
    6.样品可以直接取适量用于PCR,也可保存于-20℃长期保存。 
扫一扫访问手机站扫一扫访问手机站
访问手机站